در این مطالعه از خواص مهم خاویار (تخمهای خاویاری) برای روشن شدن نقش آن در تولید آدیپونکتین و ضد پیری پوست استفاده شد.
اخیراً از خاویار نه تنها به عنوان یک غذای مغذی، بلکه در محصولات آرایشی و بهداشتی نیز استفاده می شود.
به طور خاص، گزارش شده است که دوکوزاهگزانوئیک اسید (DHA)، به عنوان یکی از اجزای اصلی فسفولیپیدی عصاره باعث تجمع چربی درون سلولی و بیان آدیپونکتین در سلولهای چربی میشود.
اگرچه سلولهای چربی به خوبی شناخته شدهاند که با ترشح عوامل مختلف (به عنوان مثال، آدیپونکتین) با درم پوست مرتبط هستند، اما اثرات عصاره خاویار و DHA بر روی پوست به خوبی مورد مطالعه قرار نگرفته است.
در اینجا، ما خواص مهم خاویار و DHA را بر تمایز سلولهای چربی و تولید آدیپونکتین نشان میدهیم که منجر به نقش پیشگیرانه در پیری پوست تحت تابش UV میشود.
عصاره خاویار و DHA تمایز سلول های چربی را افزایش دادند و سنتز فاکتورهای رونویسی کنترل کننده تمایز سلول های چربی و آدیپونکتین را ترویج کردند.
علاوه بر این، سطح بیان mRNA ماتریکس متالوپروتئیناز-1 (MMP-1) در فیبروبلاستهای Hs68 تحت تابش اشعه UVB که در محیط مطبوع از عصاره خاویار یا سلولهای چربی تمایز شده تحت درمان با DHA کشت داده شدند.
کاهش یافت. در مجموع، این نتایج نشان میدهد که عصاره خاویار و DHA تمایز سلولهای چربی و تولید آدیپونکتین را القا میکنند و در نتیجه از پیری زودرس پوست ناشی از UVB از طریق سرکوب تولید MMP-1 جلوگیری میکنند.
1. مقدمه خواص مهم خاویار
پوست، یک اندام ضروری متشکل از چندین نوع سلول و لایه های متعدد، مانعی فیزیکی برای عوامل محیطی ایجاد می کند، در برابر آب بیش از حد محافظت می کند و هموستاز فیزیولوژیکی را حفظ می کند.
به ویژه، بافت زیر جلدی که در زیر پوست درم قرار دارد، در تنظیم دمای بدن و خاصیت ارتجاعی پوست نقش دارد. اخیراً مطالعات متعددی گزارش کرده اند که برهمکنش بین درم و بافت چربی زیر جلدی در روند توسعه و بازسازی نقش دارد.
سلولهای چربی با ترشح عوامل مختلفی مانند آدیپونکتین و لپتین که بر بافتهای دیگر تأثیر میگذارند و به فیزیولوژی پوست کمک میکنند، با درم مرتبط میشوند.
آدیپونکتین یک آدیپوکینی است که از سلولهای چربی ترشح میشود که بر فرآیندهای انرژی تأثیر میگذارد و در متابولیسم لیپیدها نقش دارد.
مطالعات اخیر گزارش داده اند که آدیپونکتین اثرات مفیدی بر فرآیندهای ترمیم زخم پوستی و خواص ضد التهابی در پوست دارد.
علاوه بر این، درمان آدیپونکتین اگزوژن، پیری پوست ناشی از اشعه ماوراء بنفش را نه تنها از طریق مهار بیان ماتریکس متالوپروتئیناز-1 (MMP-1) بلکه از طریق افزایش سنتز پروکلاژن نوع I در فیبروبلاستهای پوستی انسانی (HDFs) سرکوب کرد.
ویژگی های پوست پیر مانند چین و چروک و افتادگی عمدتاً به دلیل از بین رفتن کلاژن و یکپارچگی فیبر الاستیک در پوست است.
تابش اشعه ماوراء بنفش باعث القای بیان MMP می شود که مسئول تخریب ماتریکس خارج سلولی (ECM) با جدا کردن الیاف کلاژن است و تولید کلاژن را کاهش می دهد و در نتیجه منجر به از دست دادن انعطاف پذیری و استحکام کششی می شود.
در اینجا، هدف ما تعیین اثرات ضد پیری یکی از خواص مهم خاویار و اسید دوکوزاهگزانوئیک (DHA) در فیبروبلاستهای پوستی با افزایش تولید آدیپونکتین بود.
خاویار از تخمهای ماهیان خاویاری (خانواده Acipenseridae) تشکیل شده است و به عنوان یک ماده غذایی با کیفیت بالا حاوی انواع اسیدهای چرب، اسیدهای آمینه و مواد معدنی شناخته میشود.
به طور خاص، تعدادی از مطالعات تجزیه و تحلیل ترکیب چربی خاویار گزارش شده است، زیرا لیپیدهای مشتق شده از
تخم ماهی به عنوان مواد مغذی مهم برای سلامت انسان پیشنهاد شدهاند و طبقات لیپید عملکردهای بیولوژیکی مختلفی را در ارگانیسمها انجام میدهند.
در میان آنها، خاویار حاوی سطوح بالایی از اسیدهای چرب، از جمله اسیدهای چرب اشباع نشده (PUFAs)، DHA، و ایکوزاپنتانوئیک اسید (EPA) است و نشان داده شده است که این اسیدهای چرب برای سلامت پوست مفید هستند .
اگرچه برخی از محصولات آرایشی با استفاده از خاویار با عملکرد ضد پیری پوست در بازار ظاهر شده اند، اما هنوز اثرات خاویار بر روی پوست نامشخص است.
در نتیجه، در این مطالعه، ما فرض کردیم که عصاره خاویار شامل DHA نقش بیولوژیکی در تنظیم تولید آدیپونکتین در سلولهای چربی دارد و به عنوان یک عامل ضد پیری پوست در فیبروبلاستهای تحت تابش UV عمل میکند.
این مطالعه نه تنها دانش ما را در مورد عملکرد عصاره گسترش می دهد، بلکه شواهد پشتیبانی از پتانسیل آن را به عنوان یک عنصر کاربردی برای محصولات آرایشی و بهداشتی نیز ارائه می دهد.
اثرات عصاره خاویار بر زنده ماندن سلول
در این مطالعه، ما مواد فعال را از خاویار با اتانول 70 درصد استخراج کردیم. ابتدا، ما اثرات عصاره خاویار را بر زندهمانی سلولهای 3T3-L1 با استفاده از روش MTT ارزیابی کردیم.
سلول های 3T3-L1 کشت شده با عصاره در غلظت های 0.1 تا 1000 ppm به مدت 48 ساعت انکوبه شدند. عصاره خاویار باعث کاهش قابل توجهی در زنده ماندن سلولی نشد.
عصاره خاویار باعث افزایش تمایز سلول های چربی شد. (الف) سلول های 3T3-L1 با عصاره در غلظت های نشان داده شده به مدت 2 روز تیمار شدند.
اثرات عصاره خاویار بر تمایز سلولهای چربی
سپس، ما اثرات عصاره خاویار را بر تمایز سلولهای چربی بررسی کردیم و شواهدی ارائه دادیم که عصاره خاویار ممکن است تولید آدیپونکتین را تعدیل کند.
برای ارزیابی اینکه آیا عصاره خاویار بر تمایز سلولهای چربی تأثیر میگذارد، ما آزمایشهای رنگآمیزی Oil Red O را برای تجسم لیپیدهای داخل سلولی در سلولهای چربی تمایز یافته انجام دادیم.
کشت سلولهای چربی 3T3-L1 تمایز یافته همانطور که قبلا گزارش شده بود رشد داده شد [20،21]. سلول ها با عصاره خاویار در غلظت های بین 1 تا 100 پی پی ام به مدت 6 روز پس از تحریک تمایز 3T3-L1 تحت درمان قرار گرفتند.
تروگلیتازون، یک فعال کننده قوی PPARγ، به عنوان یک القاء کننده تمایز سلول های چربی 3T3-L1 استفاده شد و در غلظت 1 میکرومولار اضافه شد.
نتایج ما نشان داد که عصاره خاویار تمایز سلول های چربی را در دوز 100 پی پی ام افزایش می دهد، همانطور که با افزایش تجمع لیپید در داخل سلول ها نشان داده شده است.
.سطوح بیان mRNA PPARγ و SREBP-1a با تیمار عصاره خاویار در دوز 100 ppm افزایش یافت، در حالی که بیان ژن C/EBPα تغییری نشان نداد.
نتایج ما شواهدی را ارائه میکند که عصاره خاویار به افزایش تمایز سلولهای چربی کمک میکند و سیگنالهای رونویسی مرتبط با تمایز سلولهای چربی ممکن است درگیر باشد.
با توجه به اینکه آدیپونکتین آدیپوکین مهمی است که از سلولهای چربی آزاد میشود و عصاره خاویار باعث تمایز سلولهای چربی میشود، بعد از درمان با عصاره مکانیسم مولکولی زیربنایی تولید آدیپونکتین را بررسی کردیم.
اثرات عصاره خاویار بر تولید آدیپونکتین
برای بررسی اثرات عصاره خاویار بر تولید آدیپونکتین، سطح بیان mRNA و پروتئین آدیپونکتین را در حضور یا عدم حضور عصاره خاویار اندازهگیری کردیم.
نتایج نشان داد که تیمار با عصاره خاویار بیان mRNA آدیپونکتین را به صورت وابسته به دوز افزایش داد (شکل 2A). مطابق با این نتیجه، سنجش ایمونوبلات نشان داد که بیان پروتئین آدیپونکتین نیز به طور چشمگیری به صورت وابسته به دوز افزایش یافته است.
مطالعات متعدد نشان داده اند که آدیپونکتین به عنوان یک سیگنال مهم در فیزیولوژی پوست عمل می کند.
بنابراین، ما به بررسی اثرات عصاره خاویار بر القای آدیپونکتین و نقش آن در عملکرد پوست پرداختیم.
سلولهای چربی 3T3-L1 با یا بدون تیمار عصاره خاویار به مدت 6 روز تمایز داده شدند و محیط آماده شده به مدت 24 ساعت به فیبروبلاست های Hs68 تابش شده با UVB اضافه شد.
2.4. تجزیه و تحلیل ترکیب لیپیدی عصاره خاویار
از آنجایی که مطالعات متعددی گزارش کرده اند که خاویار حاوی مواد مغذی مفید برای سلامتی از جمله لیپیدها است، در این مطالعه ترکیب لیپیدی عصاره خاویار را برای شناسایی جزء فعال و اعمال آن برای سلامت پوست مورد تجزیه و تحلیل قرار دادیم.